武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
棕櫚油酸(C16:1Δ9)和順式十八碳烯酸(C18:1Δ11)等ω-7脂肪酸具有重要的食品營養(yǎng)、保健與工業(yè)應(yīng)用價值。本文構(gòu)建了來自富含ω-7脂肪酸的貓爪藤(Macfadyena ungui s-cati)ACP-Δ9脫氫酶基因(Muc ACP-Δ9D)的植物組成型表達(dá)載體,農(nóng)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化...
目的構(gòu)建通用型植物GFP標(biāo)簽蛋白表達(dá)載體,研究蛋白質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)定位對蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點(diǎn),以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細(xì)胞核定位信號。利用農(nóng)介導(dǎo)植物瞬時表達(dá)侵染本氏和洋蔥表皮細(xì)胞,觀察GFP熒光表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達(dá)載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運(yùn)用于研究蛋白質(zhì)在植物細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位,具有簡單、高效和通用性的特點(diǎn)。