植物亞細(xì)胞定位 洋蔥亞細(xì)胞定位 思特進(jìn)
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植物亞細(xì)胞定位-洋蔥亞細(xì)胞定位-思特進(jìn)

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司

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報(bào)價(jià)方式 按實(shí)際訂單報(bào)價(jià)為準(zhǔn)
產(chǎn)品編號(hào) 14009365
商品介紹
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營(yíng):動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)




武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





目的研究1個(gè)白木香倍半萜合酶(ASS)的亞細(xì)胞定位,確定其功能區(qū)域,并比較3種瞬時(shí)表達(dá)體系在亞細(xì)胞定位研究中的優(yōu)劣。方法從白木香愈傷組織中提取總RNA,采用特異引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并連接于pEZS-NL載體和pFGC5941GFP改造載體上,分別構(gòu)建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2種植物表達(dá)載體,分別利用根癌農(nóng)侵染葉片、基因槍轟擊洋蔥表皮細(xì)胞、PEG轉(zhuǎn)化白木香原生質(zhì)體3種技術(shù)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)化表達(dá),激光共聚焦顯微鏡下觀察表達(dá)出的綠色熒光蛋白(GFP)融合蛋白的亞細(xì)胞定位。結(jié)果在葉片表皮細(xì)胞、洋蔥表皮細(xì)胞及白木香原生質(zhì)體中,融合蛋白綠色熒光均能被觀察到。ASS基因與GFP的融合蛋白產(chǎn)物在葉片中定位于胞質(zhì),在洋蔥表皮中定位于胞質(zhì)和細(xì)胞核,白木香原生質(zhì)體中定位于胞質(zhì)和質(zhì)體。結(jié)論 ASS基因在白木香原生質(zhì)體胞質(zhì)及質(zhì)體定位;對(duì)3種體系的結(jié)果比較表明,應(yīng)用不同體系研究蛋白的亞細(xì)胞定位可能出現(xiàn)不同的結(jié)果,這可能與同源或異源表達(dá)的植物細(xì)胞的特性有關(guān)。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





本研究旨在通過(guò)對(duì)根癌農(nóng)侵染洋蔥表皮細(xì)胞的條件進(jìn)行優(yōu)化,從而建立一種新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),并將其應(yīng)用于玉米In5-2啟動(dòng)子的功能區(qū)域的分析中,明確In5-2啟動(dòng)子的乙酰類化合物誘導(dǎo)元件的具體位置。在本研究中采用根癌農(nóng)(A grobacterium tume faciens)侵染洋蔥(Allium cepa)表皮細(xì)胞,對(duì)轉(zhuǎn)β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬時(shí)表達(dá)進(jìn)行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的濃度、侵染時(shí)間、菌液濃度、共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)GUS基因的瞬間表達(dá)的影響。結(jié)果顯示,在OD600值為0.8的農(nóng)液中15min,共培養(yǎng)3d,能夠得到較高的GUS基因瞬間表達(dá),從而建立了一種新的瞬間表達(dá)系統(tǒng)。同時(shí),構(gòu)建了含不同長(zhǎng)度的玉米(Zeamays)In5-2啟動(dòng)子片段缺失載體,利用新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)分析其功能區(qū)域,推測(cè)出乙酰類化合物誘導(dǎo)元件位于ATG上游-220~-143bp之間。結(jié)果表明新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)可以快速有效地進(jìn)行啟動(dòng)子的分析。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類作物,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,在中國(guó)乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產(chǎn)物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產(chǎn)物在植物防御、風(fēng)味形成以及人類預(yù)防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。MYB轉(zhuǎn)錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過(guò)程中的關(guān)鍵調(diào)控基因,其表達(dá)量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調(diào)控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領(lǐng)域關(guān)于MYB28和MYB29的分子特性、表達(dá)特征尚未見報(bào)道。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過(guò)比對(duì)擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實(shí)驗(yàn)室蘿卜轉(zhuǎn)錄組序列,蘿卜中調(diào)控硫苷合成的兩個(gè)關(guān)鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細(xì)胞定位、轉(zhuǎn)錄活性和表達(dá)特征等多方面進(jìn)行研究,以期,增加對(duì)蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達(dá)特征的認(rèn)識(shí),為后期通過(guò)基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎(chǔ)。


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