武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
原位雜交檢測-植物組織原位雜交檢測-原位雜交技術(shù)
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原位雜交技術(shù)基本原理
原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有放6射性或非放6射性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。
為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物。
顯色原位雜交 (CISH)
顯色原位雜交 (CISH) 能讓您利用組織學(xué)實驗室中已經(jīng)存在的方法在組織形態(tài)學(xué)背景下獲取遺傳信息。 我們提供用于CISH分析的CISH DNA探針和關(guān)鍵試劑。
熒光原位雜交 (FISH)
多重?zé)晒庠浑s交 (FISH) 能讓您利用單一樣本同時檢測多個靶標(biāo)并直觀顯示共定位情況。 使用不同光譜的熒光基團(tuán)標(biāo)記每種不同的雜交探針,這種方法能讓您在單一樣本中解析多種遺傳成分或多基因表達(dá)模式,并提供多色直觀顯示。
另一種多聚體促進(jìn)劑是聚丙0烯0酸,用其鈉鹽,濃度為2%~4%。與硫酸葡聚糖相比,其優(yōu)點是價格低廉,粘度低(MW=90 000)。小分子化學(xué)試劑酚和Guandine thiocyanate也能促進(jìn)雜交,它們可能是通過增加水的疏水性和降低雙鏈和單鏈DNA間的能量差異而發(fā)揮作用。酚作為雜交促進(jìn)劑,只能在低DNA濃度的液相雜交中觀察到,該方法曾被稱為酚乳化復(fù)性技術(shù),該法不能用于固相雜交,因酚可引起核酸與膜的非特異吸附作用,即使在液相雜交中的應(yīng)用也是有限的。而Guandine thiocyanate可通過降低雙鏈DNA的Tm值而起作用。此外,該分子還可以促進(jìn)RNA的雜交,有裂解細(xì)胞而抑制RNase的作用。總之,硫酸葡聚糖和聚乙二醇因能用于固相雜交是目前zui常用的雜交促進(jìn)劑。