動物組織原位雜交技術(shù) 植物組織原位雜交
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動物組織原位雜交技術(shù)-植物組織原位雜交

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武漢思特進科技發(fā)展有限公司主營:動植物,細菌,細胞生物實驗
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原位雜交試驗

收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達所需要的發(fā)育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時后用50%甲6醇2%多聚甲醛溶液洗,然后換成甲9醇,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理,去除色素?;蛘呤褂帽斤畴逑∪芤号囵B(yǎng),可阻斷色素的形成)




熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)是一種分子細胞遺傳學技術(shù),是20世紀80年代末期發(fā)展起來的一種非放6射性原位雜交技術(shù)。目前這項技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感5染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫5瘤遺傳學和基因組進化研究等許多領(lǐng)域。FISH的基本原理是用熒光標記的單鏈核酸為探針,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行特異性結(jié)合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸??捎脽晒鈽擞浀奶结樦苯优c染色體進行雜交從而對基因進行染色體定位。



使用分支DNA信號擴增的RNA FISH

Invitrogen? ViewRNA?和PrimeFlow?檢測是使用分支DNA信號擴增 (bDNA) 來檢測特異性信號的直接熒光RNA ISH方法。 使用獨立但兼容的信號擴增系統(tǒng)讓RNA靶標的多重復(fù)用成為可能。 熒光RNA原位雜交檢測分為四個主要步驟:樣本制備、靶標雜交、信號擴增以及檢測。 該方法可實現(xiàn)更高的特異性,更低的背景值和更高的信噪比。



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