亞細(xì)胞定位方法 思特進(jìn) 植物亞細(xì)胞定位培養(yǎng)
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亞細(xì)胞定位方法-思特進(jìn)-植物亞細(xì)胞定位培養(yǎng)

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司

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工藝 特性
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產(chǎn)品編號(hào) 14158127
商品介紹
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營(yíng):動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)




武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




通過(guò)比較不同侵染液濃度、侵染時(shí)間、取材部位、預(yù)處理等條件下的轉(zhuǎn)化效果,優(yōu)化了農(nóng)介導(dǎo)的洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化系統(tǒng),并且成功檢測(cè)到大蕉ASR蛋白(MpASR)與GFP的融合蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞中的分布。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




目的構(gòu)建通用型植物GFP標(biāo)簽蛋白表達(dá)載體,研究蛋白質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)定位對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點(diǎn),以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細(xì)胞核定位信號(hào)。利用農(nóng)介導(dǎo)植物瞬時(shí)表達(dá)侵染本氏和洋蔥表皮細(xì)胞,觀察GFP熒光表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達(dá)載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測(cè)到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號(hào)FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運(yùn)用于研究蛋白質(zhì)在植物細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位,具有簡(jiǎn)單、和通用性的特點(diǎn)。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




以苧麻優(yōu)良品系'5041-3'子葉作為受體,利用根癌農(nóng)介導(dǎo)法進(jìn)行了綠色熒光蛋白基因的遺傳轉(zhuǎn)化研究,農(nóng)菌株為EHA105,重組質(zhì)粒為pBINm-GFP5-ER。經(jīng)農(nóng)浸染后的子葉外植體經(jīng)過(guò)共培養(yǎng)、選擇培養(yǎng)、伸長(zhǎng)培養(yǎng)和生根培養(yǎng)后再生出抗性植株,對(duì)抗性植株的再生過(guò)程進(jìn)行了GFP熒光檢測(cè),結(jié)果表明,GFP基因能在苧麻中強(qiáng)烈表達(dá),證明GFP基因能夠在苧麻遺傳轉(zhuǎn)化中得到應(yīng)用。對(duì)抗性植株的Southern雜交檢測(cè)證實(shí)外源基因已整合到苧麻基因組中。


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公司名稱 武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
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