武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營(yíng)：動(dòng)植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)

樣品預(yù)處理

在待測(cè)樣品中，DNA或RNA通常都是被蛋白包裹纏繞，根據(jù)不同的細(xì)胞和組織樣品的應(yīng)用，可選擇合適的預(yù)處理方法將靶核酸暴露：

內(nèi)源性酶滅活：如果探針的檢測(cè)是通過酶促法進(jìn)行的，則樣品內(nèi)相應(yīng)的內(nèi)源性酶必須被滅活。如內(nèi)源性的POD可通過含1%H2O2的甲醛溶液處理30min。如果檢測(cè)酶為AP，可在底物溶液中加入左旋咪唑，AP檢測(cè)的內(nèi)源性背景一般來說比POD檢測(cè)的低得多，因?yàn)樵陔s交過程中，樣品中內(nèi)源性AP酶的活性基本都喪失了。

RNase處理：在DNA-DNA雜交實(shí)驗(yàn)中，RNase的處理可去除內(nèi)源性RNA，增加實(shí)驗(yàn)的信噪比。在進(jìn)行mRNA為靶標(biāo)的檢測(cè)時(shí)，RNase處理的樣品也可作為質(zhì)控對(duì)照。通常的處理方式是將DNase-free的RNase溶解于2×SSC(100μg/ml)，樣品在溶液中37℃處理60min。

肝纖維化動(dòng)物模型化學(xué)性損傷法：

雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用腹腔內(nèi)注射，次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。

評(píng)價(jià):第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬模型。6周后出現(xiàn)纖維束，纖維晚于和少于豬模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。

肝纖維化動(dòng)物模型

模型概述：

1. 任何可引起肝損傷的因素長(zhǎng)期、反復(fù)作用于，均可產(chǎn)生肝細(xì)胞變性、壞死，繼而肝和纖維組織，導(dǎo)致肝纖維化。

2. 已有化學(xué)性損傷、性、生物學(xué)、酒精性和營(yíng)養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生的機(jī)理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復(fù)性及機(jī)體自然患病過程相似程度等都不盡相同。