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SSC=150mMNaCl,15mM檸檬酸鈉溶液(pH7.4)

HCl處理：對樣本進行20-30min的200mMHCl處理，可將蛋白抽提，并將核酸序列進行一定程度的水解，增加雜交檢測的信噪比。

去垢劑處理：如果對樣品的固定、脫水、包埋等預處理過程不足以將脂膜成分破壞暴露核酸，可對樣品進行額外的蛋白去垢劑處理(如TritonX-100和SDS)。

蛋白酶處理：樣品中待雜交的核酸序列常與蛋白纏繞交聯(lián)在一起，樣品的固定步驟更是加劇了蛋白的交聯(lián)程度，因此預滲透是核酸雜交前的常規(guī)步驟，通常通過蛋白酶K的消化作用來完成。根據(jù)不同的文獻來源，蛋白酶K的工作濃度通常設為10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMCaCl2,pH7.4,酶濃度可根據(jù)具體樣品進一步優(yōu)化)，對樣品進行37°C7.5–30min的處理。染色體涂片或核片的蛋白酶K處理濃度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文獻指出，固定石蠟包埋的組織切片樣品，使用胃蛋白酶（500μg/ml，溶于200mMHCl）將得到較好的蛋白消化結果。

肝纖維化動物模型

模型概述：

1. 任何可引起肝損傷的因素長期、反復作用于，均可產(chǎn)生肝細胞變性、壞死，繼而肝和纖維組織，導致肝纖維化。

2. 已有化學性損傷、性、生物學、酒精性和營養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生的機理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復性及機體自然患病過程相似程度等都不盡相同。

1、致模因素對動物模型的影響

應明確研究目的，清楚相應人類疾病的發(fā)生、臨床癥狀和發(fā)病機制，熟悉致病因素對動物所產(chǎn)生的臨床癥狀和發(fā)病情況，致病因素的劑量。

2、動物因素對動物模型的影響  

品種、品系、年齡體重、性別、生理狀態(tài)等

3、實驗技術因素對動物模型的影響

實驗季節(jié)、晝夜過程、深度、手術技巧、實驗給藥、對照組的影響等。

4、環(huán)境因素和營養(yǎng)因素對動物模型的影響

模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關系。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項被忽視都可能給模型動物帶來嚴重影響。