武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
動物檢驗(yàn)公司-動物檢驗(yàn)
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營:動植物,細(xì)菌,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)
原位雜交過程
雜交前可進(jìn)行預(yù)雜交,以防止較高的背景染色。預(yù)雜交條件與雜交條件相同,只是預(yù)雜交液中不含探針和硫酸葡聚糖。
靶DNA的變性(對mRNA的原位雜交無需此步)
樣品DNA的變性在DNA-DNA雜交檢測中是必須的步驟,但同時(shí)可能會造成樣品形態(tài)學(xué)的部分破壞,此步是實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化的一個(gè)步驟。常用的變性方法為堿變性和熱變性,實(shí)驗(yàn)時(shí)可以摸索變性時(shí)間、變性溫度等參數(shù)以獲得佳條件。
如使用熱變性方法,可在雜交時(shí)將探針的變性和樣品DNA變性同步進(jìn)行:將樣品和探針溶液加蓋蓋玻片,置于烘箱80℃變性,染色體DNA樣品處理2min,后冷卻至37℃進(jìn)行雜交。組織樣品DNA的變性時(shí)間可增加至80℃10min。
肝纖維化動物模型化學(xué)性損傷法:
雄性Wistar大鼠,體重130g左右,用腹腔內(nèi)注射,次20mg/100g體重,從第二次起12mg/100g體重,每周注射2次,共8周。
評價(jià):第3周,在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤,炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬模型。6周后出現(xiàn)纖維束,纖維晚于和少于豬模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。
1、致模因素對動物模型的影響
應(yīng)明確研究目的,清楚相應(yīng)人類疾病的發(fā)生、臨床癥狀和發(fā)病機(jī)制,熟悉致病因素對動物所產(chǎn)生的臨床癥狀和發(fā)病情況,致病因素的劑量。
2、動物因素對動物模型的影響
品種、品系、年齡體重、性別、生理狀態(tài)等
3、實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對動物模型的影響
實(shí)驗(yàn)季節(jié)、晝夜過程、深度、手術(shù)技巧、實(shí)驗(yàn)給藥、對照組的影響等。
4、環(huán)境因素和營養(yǎng)因素對動物模型的影響
模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關(guān)系。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等,任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動物帶來嚴(yán)重影響。