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熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）是一種分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期發(fā)展起來的一種非放6射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體結構變異分析、病毒感5染分析、人類產前診斷、腫5瘤遺傳學和基因組進化研究等許多領域。FISH的基本原理是用熒光標記的單鏈核酸為探針，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行特異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。可用熒光標記的探針直接與染色體進行雜交從而對基因進行染色體定位。




原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測，與免6疫組化技術的結合應用，能將DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年Pardue和Gall將放9射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交，此后得益于分子克6隆技術的發(fā)展，及不同探針標記系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)的應用，大大增加了原位雜交檢測的應用靈活性和檢測靈敏度。

使用分支DNA信號擴增的RNA FISH

Invitrogen? ViewRNA?和PrimeFlow?檢測是使用分支DNA信號擴增 (bDNA) 來檢測特異性信號的直接熒光RNA ISH方法。 使用獨立但兼容的信號擴增系統(tǒng)讓RNA靶標的多重復用成為可能。 熒光RNA原位雜交檢測分為四個主要步驟：樣本制備、靶標雜交、信號擴增以及檢測。 該方法可實現更高的特異性，更低的背景值和更高的信噪比。