武漢思特進科技發(fā)展有限公司
主營產(chǎn)品: 檢測
思特進-安徽熒光原位雜交-安徽熒光原位雜交公司
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武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
原位雜交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分鐘。2) 置換成30%的PBST溶液,放置5分鐘3) 置換成PBST溶液,放置5分鐘,重復(fù)一次4) 置換成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘5) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理,5體節(jié)到24小時的胚胎處理3分鐘,24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發(fā)育時間越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶處理,發(fā)育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織,以便于雜交。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
預(yù)雜交1)每個管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。2)用等體積的HYB+取代HYB-。3)60℃水浴,預(yù)雜交4小時以上。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
顯色以下各步均在室溫下進行。
(1)緩沖液I洗1min。
(2)用含2%正常羊和0.3%TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。
(3)用含1%正常羊和0.3%TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。
(4)將稀釋液滴加在切片上,封口膜覆蓋,濕盒內(nèi)4℃孵育過夜。
(5)緩沖液I洗10min。
(6)緩沖液Ⅱ洗10min。
(7)加顯色液,封口膜覆蓋,避光室溫孵育2~20h,隨時鏡檢,當(dāng)顯色滿意時入緩沖液Ⅲ終止顯色。
顯色液臨用前配,其配方為:①NBT 45μl;②X-Phospllate液 35μl;③左旋咪唑 2.4mg;④緩沖液Ⅱ 加至10ml。
(8)常規(guī)脫水、透明、封固。
結(jié)果:雜交陽性信號為紫藍色顆粒。